多胺( polyamines,PAs) 是生物体内代谢过程中产生的具有生物活性的低分子质量脂肪族含氮碱,主要有腐胺( putrescine,Put) 、亚精胺( spermidine,Spd) 、精胺( spermine,Spm) 和尸胺( cadaverine,Cad)等 。多胺具有多聚阳离子特性,能与带负电荷的膜磷脂及酶蛋白结合,是植物生长发育的重要调节物质,参与植物的生长发育、果实成熟与衰老、性别分化、延迟衰老以及逆境胁迫等重要生理过程,还参与生化过程,包括 DNA 的复制转录、膜稳定、RNA 和蛋白质的翻译等。在环境胁迫下,植物体内积累大量的多胺类物质,对稳定细胞膜、核酸及蛋白质等大分子物质的构象有重要的作用,故被认为是一类与植物逆境生理有密切关系的物质。关于多胺的作用机制,一般认为其作为植物激素的媒介,像 cAMP一样起着“第二信使”的作用,因此检测植物体内的多胺含量是非常有意义的。
精胺和亚精胺的结构
指标 | 检测方法 | 需样量 | 仪器 | 询价 |
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精胺、亚精胺、腐胺、尸胺、组胺、苯乙胺、酪胺、章鱼胺、色胺 | 参考GB 5009.208-2016 高效液相色谱法 | 鲜样 | 赛默飞世尔Thermo Vaqish高效液相色谱仪 |
L-鸟氨酸经鸟氨酸脱羧酶作用,形成腐胺。腐胺在亚精胺合成酶的作用下,通过与氨丙基反应而生成亚精胺。亚精胺在精胺合成酶的催化作用下,与氨丙基反应生成精胺。由此可以看出,鸟氨酸脱羧酶是多胺来源的关键。多胺的降解过程是由精胺/亚精胺-N’-乙酰基转移酶和多胺氧化酶共同完成的,最后形成亚精胺或腐胺。精胺/亚精胺-N’-乙酰基转移酶是多胺降解的关键酶。此外,甲硫氨酸(Methionine)通过S-腺苷甲硫氨酸合成酶作用可以生成S-腺苷甲硫氨酸,然后在S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶和甲基乙二醛(双脒基腙)的作用下生成脱羧S-腺苷甲硫氨酸,在精胺合成酶和亚精胺合成酶的作用下分别生成精胺和亚精胺。
多胺的生物合成
多胺检测在生命科学研究中有着非常重要的价值。它们在体液中的含量极低;并且体液中许多物质带有氨基或芳环结构,检测时易产生干扰;多胺本身既无紫外吸收基团也无荧光生色基团,多胺的这些特点给其分离和分析带来了困难。运用高效液相色谱法检测时,研究内容主要包括以下几点:多种食品基质和样品的预处理方法、样品衍生化处理、洗脱剂及洗脱方法选择;针对不同样品和色谱填料,需要对样品进行适当的预处理,其中经常用到的有聚乙烯吡咯烷酮、三氯乙酸、高氯酸、己烷、盐酸、甲基硫酸、盐酸-硫代二丙酸等溶剂,用于提取各类样品中的生物胺和固相萃取技术中,可以实现对样品中生物胺的有效提取;样品的衍生化处理过程主要包括柱前衍生和柱后衍生两种方法,柱后衍生方法是样品在经过色谱柱分离之后,进入衍生设备中进行衍生化反应,然后再通过检测器进行检测分析,柱后衍生的所产生的色谱图干扰较少、耗时少、重复性好,并且能够实现操作的程序化和自动化。
9种生物胺标准溶液及内标衍生物液相色谱图
脯氨酸含量测定相关 植物样品膜脂中脂肪酸含量测定 芽鞘伸长法测定生长素类物质