苹果酸（malic acid），又名2－羟基丁二酸。通常情况下，苹果酸以三种形式存在，D－苹果酸、L－苹果酸以及其混合物DL－苹果酸。其中，L-苹果酸是一种天然有机物，可促进氨代谢，降低血氨浓度，对肝脏有保护作用，是治疗肝功能不全等病痛的良药。

一、测定方法

    采用高效液相色谱（HPLC）法测定苹果酸含量。

二、实验原理

    色谱分析中，在相同的操作下，用已知纯样品配成不同浓度的标准溶液进行试验，测量各种浓度下对应的峰高和峰面积，用峰高或峰面积对浓度做出标准曲线。样品分析时，将相同体积的分析样品进样，从色谱图上求出待测组分的峰高或峰面积，根据标准曲线查出样品中待测组分的含量。

三、实验试剂

    0.5%H3PO4/KH2POA缓冲液；
    苹果酸标准品；
    苹果酸标准溶液。

四、实验步骤

    ①样品溶液的制备
    称取浓缩果汁4.0-5.0g或清汁10ml，精确到0.01g，用蒸馏水将果汁溶于容量瓶中，定容至50ml，摇匀，过滤，备用。
    ②测定
    在适宜色谱条件下，运行及检测，待基线稳定后，依次将标准溶液、样品进样。

五、计算

    根据标准液绘制的标准曲线进行外标法定量计算。