采用蒽酮比色法或苯酚法测定可溶性总糖含量。
糖类在强酸环境下脱水成糖醛,糖醛与苯酚脱水缩合,生成蓝色衍生物,该衍生物珍在620处有最大吸收峰,且在一定范围内,颜色深浅和可溶性含量成正比。
分光光度计等;
蒽酮试剂、葡萄糖标准液等。
①标准曲线制作
取7支试管,按下表配置:
试管号 | 葡萄糖标准液/ml | 蒸馏水/ml | 蒽酮试剂/ml | 葡萄糖含量/μg |
---|---|---|---|---|
1 | 0 | 1 | 4.0 | 0 |
2 | 0.1 | 0.9 | 4.0 | 10 |
3 | 0.2 | 0.8 | 4.0 | 20 |
4 | 0.3 | 0.7 | 4.0 | 30 |
5 | 0.4 | 0.6 | 4.0 | 40 |
6 | 0.6 | 0.4 | 4.0 | 60 |
7 | 0.8 | 0.2 | 4.0 | 80 |
配置完成后,在沸水浴加热10min后,冷却,在620nm处测吸光值。
②样品提取
取植物样品组织1g,沸水浴加热10min,过滤,滤液置于容量瓶中,定容至50ml,摇匀待用。
③测定
取稀释后的提取液1ml,加入蒽酮试剂4ml,在620nm测吸光值。
可溶性总糖含量=U’×n÷W/
U’——从标准曲线上算得的糖mg数;
n——稀释倍数;
V——样品提取液体积ml;
W——样品g数。