酒石酸(tartaric acid)又称2,3-二羟基丁二酸,是一种羧酸。酒石酸的结构简式为HOOCCH(OH)CH(OH)COOH,酒石酸存在于多种植物中﹐同时是葡萄酒中主要的有机酸之一。通常,外消旋型酒石酸又称为葡萄酸。
采用HPLC法测定酒石酸。
流动相和固定相均是液体,流动相与固定相之间应互不相溶,且两者有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱,溶质在两相间进行分配。达到平衡时,用高效液相色谱计算公式来测定。
80%乙醇(500mL);酒石酸(500g);磷酸二氢铵(500g)。
①标准溶液的配制
称取酒石酸标准品0.25g,于烧杯中用二次蒸馏水溶解,转移至100mL容量瓶中加二次蒸馏水稀释并定容,然后用移液管移取分别稀释成2.5μgmL-1、2.0μgmL-1、1.5μgmL-1、1.0μgmL-1、0.8μgmL-1等不同质量浓度的标准品,并用0.45μm的滤膜过滤,然后超声处理。
②流动相的配制
用电子天平称取1.3206g(NH4)2HPO4晶体,于小烧杯中加入少量二次蒸馏水完全溶解,然后转移到1000mL容量瓶中并定容至刻度线,最后经0.45μm的滤膜过滤,超声15min处理作为流动相。按上述色谱条件,待基线稳定后,用移液管准确移取1.5mL不同质量浓度的样品分别置于进样瓶中,放入高效液相色谱仪进样盘中,洗针并进样,依次对不同质量浓度的标准品进行测定。
K=Cs/Cm=k(Vm/Vs)
Cs—溶质在固定相中浓度;
Cm—溶质在流动相中的浓度;
Vs—固定相的体积;
Vm—流动相的体积。