硫代葡萄糖苷(Glucosinolates)是油菜籽中产生毒性的前体物质,硫代葡萄糖苷的含量直接影响油菜籽的品质,因此,对硫代葡萄糖苷含量的测定至关重要。卡文思采用内源酶法测硫代葡萄糖苷含量,方法简单易行,回收率高。
采用内源酶法测定硫代葡萄糖苷含量。
油菜籽中含有硫代葡萄糖苷葡萄糖水解酶,简称硫代酶。当油菜籽破碎后,硫代酶可水解硫代葡萄糖苷,释放出葡萄糖,然后以3,5-二硝基水杨酸(DNS)为显色剂,测定葡萄糖的含量,在换算成硫苷总量,40%的酸化甲醇可完全抑制硫苷酶活性。菜籽中原有的还原糖对测定的影响可通过平行对照实验消除。
10%氢氧化钠、40%酸化甲醇等。
取试样1g,两份。第一份加水2ml,第2份加40%酸化甲醇2ml,研磨,静置20min,加40%酸化甲醇至20ml,终止反应,摇匀,离心15min。取上清液测定葡萄糖量。根据葡萄糖标准曲线查得葡萄糖浓度。
硫代葡萄糖苷含量(μmol•g-1)=U×V÷m。
U——葡萄糖浓度,μmol•ml-1;
V——样品总体积,ml;
m——样品重,g。