维生素D是一种脂溶性物质，无臭、无味，性质稳定。维生素D不易溶于水，易溶于乙醇、丙酮、乙醚及氯仿。维生素D具有促进钙质吸收的作用，人体缺乏维生素D时，易患软骨病、佝偻病等。

一、测定方法

    采用高效液相色谱法测定维生素D。

二、测定原理

    样品皂化后，用石油醚萃取不皂化物质，萃取物经正相色谱柱分离富集，用反相色谱柱进一步分离，紫外检测仪测定，与标准试样比较定量。

三、器材和试剂

    高效液相色谱仪；
    无水乙醇、石油醚、无水硫酸钠、甲醇等。

四、实验步骤

    ①样品预处理
　　取适量样品，用乙醇-氢氧化钾溶液进行皂化，皂化完成后，进行样品纯化。
    ②绘制标准曲线
　　分别吸取VD3（VD2）标准储备液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml于棕色容量瓶中，在吸取1mlVD2（VD3）标准储备液用乙醇定容至100ml，摇匀。注入液相色谱仪中，分析峰面积，以峰面积为纵坐标，以标准工作液浓度为横坐标绘制标准曲线。
    ③测定
　　取维生素D测定液20μL注入液相色谱仪中，得到峰面积，根据标准曲线得到维生素D测定液中VD3浓度。

五、结果分析

    略。