本文介绍了植物抗逆性的测定(电导仪法)的测定方法,包括电导仪法测定的原理,实验所需试剂,实验步骤以及实验注意事项。
原理:
植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下,细胞膜对物质具有选择透性能力。当植物受到逆境影响时,如高温或低温,于早,盐溃、病原菌侵染后,细胞膜遭到破坏,膜透性增大,从而使细胞内的电解质外渗,以致植物细胞浸提液的电导率增大。膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关,也与植物抗逆性的强弱有关。这样,比较不同作物或同一作物不同品种在相同胁迫温度下膜透性的增大程度,即可比较作物间或品种间的抗逆性强弱,因此,电导法目前已成为作物抗性裁培、育种上鉴定植物抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。
材料、仪器设备及试剂
(一)材料
小麦、女贞叶片。
(二)仪器设备
电导仪,天平,温箱,真空干燥器,抽气机,恒温水浴锅,注射器。
(三)试剂
NaCl溶液。
方法步骤:
(1)制作标准曲线:如需定量测定透性变化,可用纯NaCl配成010ug/mL、20ug/mL、40ug/mL、60ug/mL、80ug/mL、100ug/mL的标准液在20-25℃恒温下用电导仪测定,可读出电导度。
(2)选取小麦或其他植物在一定部位上生长叶龄相似的叶子若干,剪下后,先用纱布拭净,称取两份,各重2g。
(3)一份插人小杯中放在40C恒温箱内萎蔫0.5~1h,另-份插人水杯中放在室温下做对照。处理后分别用蒸馏水冲洗两次,并用洁净滤纸吸于。然后剪成长约1em小段放入小玻杯中(大小以能够容纳电极为度),并用玻棒或干净尼龙网压住,在杯中准确加人燕馏水20ml,浸没叶片。
(4)放入真空干燥器,用抽气机抽气7~8min以抽出细胞间腺中的空气。重新缓缓放人空气,水郎被压入组织中而使叶下沉。
(5)将抽过气的小玻杯取出,放在实验桌上静置20min,然后用玻棒轻轻搅动叶片,在20~25℃恒温下,用电导仪测定溶液电导率。
(6)测过电导率之后,再放人100C沸水浴中15min,以杀死植物组织,取出放人自来水冷却10min,在20~25℃恒温下测其煮沸电导率。
实验结果及分析
伤害率可以用下列三种形式表示:
试比较不同处理(萎蔫处理与对照)的叶片细胞透性的变化情况,记录结果,并加解释。
注意事项
(1)整个过程中,叶片接触的用具必须绝对洁净(全部器皿要洗净),也不要用手直接接触叶片,以免污染。
(2)各处理和对照的待测液的体积要-一样。
(3)测定后电极要清洗干净。